在畜牧業(yè)生產(chǎn)中,為減少豬病的發(fā)生和流行,除加強豬場的隔離消毒,減少環(huán)境中的病毒,還必須指定合理的免疫程序,使得豬體內(nèi)長期保持抵抗豬病強毒攻擊的有效抗體,而要了解豬體內(nèi)的有效抗體水平,就必須開展豬病免疫抗體水平監(jiān)測。
目前國內(nèi)對豬病抗體水平檢測方法很多,如ELISA檢測法、DOT-ELISA檢測法和間接血凝法等,這些檢測方法雖然具有微量、特異的優(yōu)點,但需要條件較好、設備齊全的實驗室,對操作人員要求專業(yè)性高,而且檢測程序繁瑣,一次檢測至少需要6個小時。不適合于缺少儀器設備和專門技術人員的基層獸醫(yī)站、養(yǎng)豬場的使用。
近年來,隨著膠體金免疫層析技術及生化制備技術的發(fā)展,在人醫(yī)上用膠體金免疫層析法檢測血清中各種抗體已成為現(xiàn)實。
目前,“豬病(豬瘟病毒、豬藍耳病病毒、豬偽狂犬病毒、豬口蹄疫病毒、圓環(huán)病毒)抗體快速檢測卡”就可以在很短的時間內(nèi)檢測出豬只接種豬?。ㄈ缲i瘟)疫苗后,豬體是否產(chǎn)生有效抗體、為當前*檢測手段。
且該方法操作簡便,不需要任何儀器設備及復雜的樣品處理,檢測一個樣品只需10-15min,結果顯示直觀,重復性好,容易判定,非常適應基層獸醫(yī)站、獸醫(yī)門診和各養(yǎng)豬場開展疫病的監(jiān)測及區(qū)域性疫病普查。
原理:本試劑采用膠體金免疫層析試驗(GICA)原理制成,樣本加入到加樣孔后與膠體金標記物一起沿層析膜移動,若樣本中存在豬瘟病毒抗體則與膠體金標記物及檢測線上的抗原結合而顯示紫紅色,若樣本中不存在豬瘟病毒抗體則不產(chǎn)生顏色反應。
檢測方法:撕開檢測卡鋁箔包裝袋,取出檢測卡,放于平整、潔凈的臺面上,使用袋內(nèi)吸管取1滴血清或2滴全血緩慢滴加到加樣孔內(nèi),再滴加2滴稀釋液到加樣孔。室溫下放置,10-15 分鐘判斷結果,15 分鐘后的顯色結果無效。
結果判斷:
1、陰性:在觀察孔內(nèi),只有對照線區(qū)(C)出現(xiàn)一條紫紅色線。
2、陽性:在觀察孔內(nèi),檢測線區(qū)(T)及對照線區(qū)(C)同時出現(xiàn)紫紅色線。抗體滴度越高,檢測線(T)顏色越深。
3、無效:在觀察孔內(nèi),對照線區(qū)(C)不出現(xiàn)紫紅色線。
診斷參考
1、 如果該豬未接種過豬瘟病毒疫苗:
A. 當被檢樣品檢測線 T 處無明顯色帶出現(xiàn),該樣本中不含有豬瘟病毒抗體,如果種群健康,則表示沒有豬瘟病毒感染,應當及時進行豬瘟病毒疫苗接種。如果出現(xiàn)相應的急性癥狀,則不能排除有豬瘟病毒感染。
B. 當被檢樣品檢測線 T 處有明顯色帶出現(xiàn),則該動物存在豬瘟病毒感染,或既往感染,應進一步驗證。
2、 如果該豬已接種過豬瘟病毒疫苗:
A. 當被檢樣品檢測線 T 條帶的色澤≥對照卡中 1:32 效價時,說明豬瘟病毒抗體的滴度較高,已達到抵御野毒攻擊的保護水平,同時說明感染野毒的可能性較小。
B. 當被檢樣品檢測線T 條帶的色澤<對照卡中 1:32 效價時,說明豬瘟病毒抗體效價未達到抵御豬瘟病毒野毒攻擊的*保護滴度,存在感染野毒的風險,建議進行疫苗補種。
鑒于豬病(如豬瘟)抗體快速檢測卡具有簡便、準確、快速和容易判定的特點,就能為一些基層獸醫(yī)站和養(yǎng)豬場檢測豬病(如豬瘟)抗體提供非常好的條件。
根據(jù)我們的實際經(jīng)驗,我們以豬瘟抗體快速檢測卡為例說明,在以下幾種情況下使用豬?。ㄈ缲i瘟)抗體快速檢測卡,對指導豬?。ㄈ缲i瘟)免疫和建立適宜的免疫程序,可以收到很好的效果。
一、可用于檢驗豬瘟疫苗的質(zhì)量和確定免疫的最適劑量
如養(yǎng)豬專業(yè)戶或大型養(yǎng)豬場購買大批量的豬瘟疫苗放在自己場里的冰箱凍結層內(nèi),每次*購買同一批號(一般以生產(chǎn)日期定批號)的豬瘟疫苗??梢詮闹腥〕鲆黄恳呙纾x擇不同日齡的乳豬,小豬,種豬若干頭,分別應用2頭份,3頭份,4頭份,5頭份豬瘟疫苗進行免疫接種,免疫15天后采血,用抗體快速檢測卡測定抗體滴度,如果各組都能產(chǎn)生抵制豬病強毒攻擊的免疫抗體時,則可以從中選擇免疫頭份少,抗體滴度高作為本批號疫苗*免疫劑量。如果檢測的豬瘟抗體達不到強毒攻擊的*保護抗體時,則應當檢查是否是疫苗本身問題,還是豬群存在有免疫抑制病毒(如圓環(huán)病毒)等的干擾。
這時可以采取更換該廠家不同批號的豬瘟疫苗或另選廠家的豬瘟疫苗,再按上述方法進行不同劑量免疫,來確定是否是該批疫苗失效或是免疫抑制病毒的干擾,判定適宜的免疫劑量。
二、在母豬分娩時使用
當母豬分娩時,用豬瘟抗體快速檢測卡檢測母豬的抗體水平。
檢測結果:如果在試紙條上只出現(xiàn)一條色線(C質(zhì)控線),說明母豬體內(nèi)的豬瘟抗體滴度已低于抵抗豬瘟強毒攻擊的*保護抗體,母豬應當及時進行豬瘟疫苗接種,同時乳豬應當及時采用超前免疫,以免發(fā)生豬瘟病。如果母豬檢測出現(xiàn)二條色線,說明體內(nèi)的豬瘟抗體滴度較高,可以抵抗豬瘟強毒的攻擊,就不需要進行超前免疫,因為母豬可以通過初乳把豬瘟抗體垂直帶給仔豬。這時仔豬可以按照正常的免疫程序進行預防注射。
三、當無法判斷有無豬瘟時使用
當從外地,尤其是從外地區(qū)或外省購進大批量的小豬種或種豬時,飼養(yǎng)主自己無法了解購買的小豬是否進行過豬瘟疫苗免疫或者免疫是否有效。為了防止豬瘟病發(fā)生,選擇什么時間再進行豬瘟免疫最適宜時,則可以根據(jù)不同地區(qū),不同日齡的豬只,選擇有代表性的豬只采血,應用豬瘟抗體快速檢測卡進行快速檢測,通過檢測結果,可以了解整個豬群豬瘟抗體的狀況來決定是否及時開展免疫及選擇適宜的免疫劑量,這樣可以大大的避免豬瘟病的發(fā)生。
四、在懷疑發(fā)生豬瘟病時使用
可以采集病豬血液(血清)用豬瘟抗體快速檢測卡檢測,如果是發(fā)生豬瘟病時,豬體血液中沒有豬瘟抗體或抗體滴度很低。當然,發(fā)生豬瘟而耐過不死的豬只,抗體滴度可能會很高。
五、在發(fā)生豬瘟后使用
進行疫病監(jiān)測時,可應用抗體快速檢測卡進行快速檢測。如豬場發(fā)生豬瘟病時,常規(guī)的處理程序是全面隔離消毒和緊急預防注射。此時豬群特別是種豬場的豬群的抗體滴度差異很大,當緊急預防注射后的抗體滴度水平又會出現(xiàn)明顯的差異,因此,還應了解豬群豬瘟抗體水平,制定合理的免疫程序尤為重要。