產地 | 北京 |
保存條件 | |
品牌 | 賽諾利康 |
貨號 | |
用途 | |
檢測方法 | PCR |
CAS編號 | |
保質期 | 12個月 |
適應物種 | |
檢測限 | |
數(shù)量 | |
包裝規(guī)格 | |
標記物 | |
純度 | % |
樣本 | |
應用 | |
是否進口 | 否 |
豬流行性腹瀉抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法)
使用說明書
產品名稱
通用名:豬流行性腹瀉抗體檢測試劑盒(酶聯(lián)免疫法)
包裝規(guī)格
96T×1/盒
檢測原理
本試劑盒由預包被豬流行性腹瀉抗體重組蛋白的酶標板、酶標記物及其他配套試劑組成,應用酶聯(lián)免疫法(ELISA)原理檢測豬血清、血漿樣本中豬流行性腹瀉抗體。實驗時在酶標板中加入對照血清和待檢樣本,經溫育后若樣品中含有豬流行性腹瀉抗體,則將與酶標板上抗原結合,經洗滌除去未結合的其他成分后;再加入酶標記物,與酶標板上抗原抗體復合物發(fā)生特異性結合;再經洗滌除去未結合的酶標記物,在孔中加TMB底物液,與酶標結合物反應形成藍色產物,顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關;加入終止液終止反應后,產物變?yōu)辄S色;用酶標儀在450nm波長測定各反應孔中的吸光值,即可知樣品是否含有豬流行性腹瀉抗體。
試劑盒組成
儲存及有效期
2~8℃保存,有效期12個月。
包被板開封后請于2~8℃避光保存,避免受潮。使用期限為2個月。
適用儀器
含450nm波長的酶標儀,37℃恒溫設備,可調微量移液器。
樣品準備
1.取動物全血按常規(guī)方法制備血清,要求血清清亮,無溶血、無污染。樣品1周內可于2~8℃保存,長期需置-20℃保存。
2.根據(jù)樣本數(shù)量準備對應數(shù)量的小刻度EP管或血清稀釋盤,用樣品稀釋液將待檢血清按50倍稀釋(如4μl血清加入196μl樣品稀釋液中,混勻)陰性、陽性對照不用稀釋。
3.濃縮洗滌液使用前應恢復至室溫使沉淀溶解,然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋成工作洗滌液(如19份蒸餾水或去離子水加1份濃縮洗滌液)。
檢驗方法
1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘,恢復至室溫。
2.取所需用量酶標板條,設陰性、陽性對照各1孔,未用的板條盡快密封,2~8℃保存。
3.陰性、陽性對照孔分別加入陰性、陽性對照100μl;樣品孔每孔加入稀釋后的樣品100μl。
4.混勻,蓋好蓋板膜,置37℃溫箱孵育30分鐘。
5.甩去孔內液體,每孔加250ul工作洗滌液,用震蕩混勻的方式洗滌60秒后棄去,重復洗滌5次,每次洗滌后需拍干液體。
6.每孔加酶標記物100μl,置37℃避光反應30分鐘。
7.甩去孔內液體,每孔加250ul工作洗滌液,用震蕩混勻的方式洗滌60秒后棄去,重復洗滌5次,每次洗滌后需拍干液體。
8.根據(jù)樣本數(shù)量將顯色液A與顯色液B按等體積比例混勻配置為底物工作液,現(xiàn)配現(xiàn)用。每孔加100ul,置37℃避光反應10分鐘。
9.每孔加終止液100μl,混勻,于450nm 測定各孔吸光值(OD值),
參考值
實驗正常的情況下,陽性對照OD-陰性對照OD>0.2。
檢驗結果的解釋
1. S/P=(樣本OD-陰性對照OD)/(陽性對照OD-陰性對照OD)。
2. S/P≥0.4時結果判讀為陽性。
3. 0.2<S/P<0.4時結果為疑似陽性;若接種過對應疫苗,則提示抗體水平不足,建議補打疫苗。
4. S/P<0.2時結果判讀為陰性。
試驗方法的局限性
1. 本試劑盒僅作為定性檢測豬血清、血漿中豬流行性腹瀉抗體的粗略評估。
2. 本試劑盒僅供研究使用,不得用于臨床實驗或人體實驗。
注意事項
1.實驗操作時需戴手套、穿工作衣,嚴格健全和執(zhí)行消毒隔離制度,各種實驗廢棄物都應按傳染物處理。
2.終止液具有腐蝕性,應避免接觸皮膚和衣物,如不慎接觸請立即用大量自來水沖洗。
3.酶標板從冷藏環(huán)境中取出時應恢復至室溫方可開袋,未用完的酶標板需放入有干燥劑的密封袋中保存。
4.濃縮洗滌液在低溫時容易結晶,使用時需恢復至室溫以完全溶解。
5.洗滌時各孔均需加滿液體,防止孔口有游離酶不能洗凈。
6.用于檢測的樣品應保持新鮮。
7.試驗結果的判定必須以酶標儀讀數(shù)為準。
8.不同批號試劑組分不得混用。
生產企業(yè)
企業(yè)名稱:賽諾利康生物技術(北京)有限公司
電 話:010-80765002
傳 真:010-58859364
郵 編:102218
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