患者在急性期有發(fā)熱、寒戰(zhàn)、虛汗、疲乏、游走性版關(guān)節(jié)痛苦及食欲不振等癥狀。但一般多為緩慢發(fā)病,患者有肝、脾、淋巴結(jié)腫大,部分患者可有睪丸炎、輸卵管炎等生殖系統(tǒng)炎癥。發(fā)熱后常權(quán)伴有很多出汗、頭痛等癥狀,病程在3個(gè)月內(nèi)為急性期;3~6個(gè)月為亞急性期;6個(gè)月以上為慢性期。
人用布病試管凝集抗原
【包裝規(guī)格】
12ml/瓶
【預(yù)期用途】
本品用于體外定性檢測人血清樣本中布魯氏菌抗體,檢測結(jié)果僅用于科研學(xué)術(shù)參考,不能作為臨床診斷依據(jù)。
布魯氏菌病是由布魯氏菌屬細(xì)菌引起的人畜共患的傳染病。布魯氏菌具有很強(qiáng)的侵襲力和擴(kuò)散力,當(dāng)人與牲畜及其污染物接觸過程中,可以經(jīng)過皮膚、消化道、呼吸道黏膜等侵入人體。布魯氏菌抗體的產(chǎn)生始于感染后的 2-3 周。血液中產(chǎn)生的抗體可反映出感染的發(fā)生及發(fā)展過程,因此檢查血液中布魯氏菌抗體對(duì)了解布魯氏菌病的感染、發(fā)病、治愈等具有一定的意義。
虎紅平板凝集試驗(yàn)(BPAT)進(jìn)行人布魯氏菌病的血清學(xué)診斷,染色抗原在酸性條件下表現(xiàn)出有選擇的吸收 IgG抗體的能力,從而提高了檢測的敏感度,同時(shí)也證明有很好的特異性;在具有高 IgG抗體水平的慢性個(gè)體臨床診斷過程中也十分有效。
【檢驗(yàn)原理】
在酸性緩沖條件下經(jīng)虎紅染色的菌體抗原可特異結(jié)合人血清樣本中布魯氏菌抗體,在適量電解質(zhì)作用下,經(jīng)過一段時(shí)間出現(xiàn)肉眼可見的凝集,從而定性地判斷血清樣本中有無布魯氏菌抗體。
【主要組成成分及性狀】
本品呈紅色均勻混懸液,久置后上部澄清,底部可有少量紅色菌體沉淀。本品主要成分是經(jīng)加熱滅活、虎紅鈉鹽染液染色的布魯氏菌牛型 104M株菌體,菌體懸于含 5g/L苯酚的乳酸緩沖液中。
【儲(chǔ)存條件及有效期】
于 2~ 8℃下避光保存,有效期 24個(gè)月。
試劑反復(fù)多次開瓶使用后,6個(gè)月內(nèi)試劑性能不發(fā)生變化。
生產(chǎn)日期、有效期至:見標(biāo)簽。
【運(yùn)輸條件】2~ 30℃運(yùn)輸(30℃不超過 6天)。
【實(shí)驗(yàn)器具】
1.實(shí)驗(yàn)應(yīng)使用潔凈、無油脂的玻璃板、載玻片或?qū)S玫幕⒓t平板凝集反應(yīng)板。
2.實(shí)驗(yàn)使用的吸管或移液器吸頭使用前應(yīng)徹底清洗。
【樣本要求】
1.樣本的處理:應(yīng)采集空腹待檢者的血液不少于 1mL,靜置或離心后采集血清。
2.樣本的儲(chǔ)存:血清樣品若在一周內(nèi)進(jìn)行檢測可儲(chǔ)存在 2~ 8℃條件下;若超過一周應(yīng)將樣本儲(chǔ)存于 -20℃條件下,同時(shí)應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3.已知干擾:
①患者治療期間,血清中藥物成分會(huì)造成部分血清樣本的凝集現(xiàn)象不明顯甚至出現(xiàn)假陰性,可選擇在療程間隔期進(jìn)行復(fù)檢樣本的血清學(xué)檢驗(yàn)。
②出現(xiàn)明顯溶血、微生物污染的樣本不能用于檢測。
③在以下干擾物質(zhì)濃度條件下,對(duì)布魯氏菌抗體檢測的結(jié)果影響較小:甘油三脂≤ 10mmol/L 類風(fēng)濕因子≤ 300IU/mL 總膽紅素≤ 43umol/L。
【檢驗(yàn)方法】
1.反應(yīng)于室溫(18~ 25℃)條件下進(jìn)行,試驗(yàn)前將試劑、待檢樣本以及反應(yīng)板、移液器吸頭等用具置于室溫下平衡 30分鐘以上。
2.試劑使用前應(yīng)充分搖勻。
3.在玻璃板上準(zhǔn)確滴加30ul待檢樣本,再加入30ul虎紅平板凝集抗原,用玻璃棒或吸頭混勻 (不同樣本使用單獨(dú)的玻璃棒或吸頭,切勿混用以免影響結(jié)果 ),5分鐘內(nèi)判定結(jié)果。
4.肉眼觀察,按下列標(biāo)準(zhǔn)判定凝集反應(yīng)的強(qiáng)度:
序號(hào) | 反應(yīng)現(xiàn)象 | 強(qiáng)度判定 |
1 | 凝集塊呈菌叢狀,出現(xiàn)大的凝集片或小的粒狀物,凝集物之間液滴完全透明 | ++++ |
2 | 液滴有明顯的凝集片,凝集物之間液滴幾乎完全透明 | +++ |
3 | 液滴周圍形成明顯卷邊,凝集物之間液滴稍清亮 | ++ |
4 | 液滴中央部分可見少量凝集,液滴周圍稍有卷邊形成,凝集物間液滴呈紅色 | + |
5 | 無凝集,液滴呈均勻粉紅色 | — |
反應(yīng)強(qiáng)度的判定標(biāo)準(zhǔn)不能作為樣本滴度的確證依據(jù),“+”及以上程度的凝集均應(yīng)做進(jìn)一步的布魯氏菌試管凝集試驗(yàn)或者補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)。 |
5.試驗(yàn)出現(xiàn)凝集現(xiàn)象可判定為虎紅平板凝集反應(yīng)疑似陽性;“-”不出現(xiàn)凝集反應(yīng)為陰性。
【檢測結(jié)果的解釋】虎紅平板凝集反應(yīng)陽性可判為布魯氏菌病疑似陽性病例。
【診斷標(biāo)準(zhǔn)】: 布魯氏菌病診斷標(biāo)準(zhǔn)(WS268-2007)。
【產(chǎn)品性能指標(biāo)】
*檢出量:20 IU/mL。
【檢驗(yàn)方法的局限性】
1、本試劑檢測用樣本為人血清,在樣品保存、使用過程中,應(yīng)注意因樣本可能存在潛在病原微生物(乙型肝炎、丙型肝炎、梅毒及 HIV病毒等)引起感染風(fēng)險(xiǎn)。
2、檢測過程中,發(fā)現(xiàn)可疑樣本時(shí),應(yīng)進(jìn)一步使用試管凝集試驗(yàn)或補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn) (CFT)、抗人免疫球蛋白試驗(yàn) (Coomb’s) 等其它試驗(yàn)方法對(duì)檢測結(jié)果進(jìn)行確認(rèn)。
3、虎紅平板凝集試驗(yàn)是一種定性的初篩檢測方法,而布氏菌病的臨床診斷較為復(fù)雜,不能只基于本試驗(yàn)的結(jié)果進(jìn)行診斷,需進(jìn)一步結(jié)合流行病學(xué)、臨床癥狀以及試管凝集試驗(yàn) (SAT)或補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn) (CFT)、抗人免疫球蛋白試驗(yàn) (Coomb’s)等試驗(yàn)的結(jié)果予以綜合判定。
4、檢測過程中暫無發(fā)現(xiàn)前帶現(xiàn)象。
5、雖然文獻(xiàn)報(bào)道布魯氏菌與腸炎耶爾辛氏 O:9、甲型副傷寒沙門氏菌、大腸桿菌 O:157存在共同抗原,但虎紅平板凝集試驗(yàn)檢測過程中暫未發(fā)現(xiàn)有交叉反應(yīng)。