蛋白含量檢測(cè)試劑盒(BCA法)

原理

在堿性環(huán)境下蛋白質(zhì)分子中多肽鍵結(jié)構(gòu)與Cu2+絡(luò)合并將Cu+，Cu+特異性結(jié)合成穩(wěn)定的紫色復(fù)合物，該復(fù)合物在)

試劑B 30ml (4℃保存)

儀器

酶標(biāo)儀或分光光度計(jì)，工作波長(zhǎng)540nm~590nm，*工作波長(zhǎng)490nm波長(zhǎng)。

適用范圍

不含還原劑的蛋白樣品。

實(shí)驗(yàn)步驟

B按2. 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋：用純化水將2mg/ml的1600、400、100、25ug/ml。注意用純化水標(biāo)記空白。

30分鐘或室溫下靜置4. 在酶標(biāo)儀或分光光度計(jì)上，以562nm波長(zhǎng)下，空白管調(diào)OD值。

Y軸，標(biāo)準(zhǔn)品濃度為6. 從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查找待測(cè)樣品濃度，注意稀釋后的樣品所測(cè)濃度需乘以稀釋倍數(shù)。

說明

20-2000ug/ml，若樣本超過此范圍需再酌情稀釋。

10mM時(shí)不可直接使用3. 在37℃孵育2小時(shí)對(duì)檢測(cè)比較便利，但嚴(yán)格來講，此時(shí)反應(yīng)尚未達(dá)到終點(diǎn)，通常每A562下2.3%，在4. 可測(cè)量吸附于固相支持物如酶標(biāo)版、瓊脂糖、親和層析凝膠上的蛋白。

<span font-size:19px;"="">5. 本法僅適用于科研。